由于间充质干细胞(MSC)具有自我更新和多向分化的能力,如分化成脂肪,骨,软骨,心肌等多种细胞,并能通过多种机制活化机体功能,在伤口愈合及免疫系统疾病治疗等多方面起到重要的作用,因此运用干细胞移植治疗疾病的前景非常广阔。间充质干细胞的主要来源包括脐带、脂肪、骨髓,在体外有效获得大量间充质干细胞是临床应用的基础。目前市场上可提供间充质干细胞扩增培养基分多种类型:含血清,含血清替代物及成分明确的培养基。
康宁Corning® MSC Xeno-Free SFM(Corning Cat. No 88-600-CV)可支持间充质干细胞体外扩增, 并且不含动物来源成分,不需要对培养耗材预包被即可在普通组织处理表面(Tissue culture treated, TCT)上支持间充质干细胞的生长,是体外扩增间充质干细胞的理想选择。同时,康宁提供独特的CellBIND®细胞培养表面,增加了表面湿润的持久性和细胞吸附的稳定性,可以更好的支持贴壁细胞的培养。
成分明确,不包含血清及其他任何人源以外成分使用方便,无需额外添加物
运输及存储温度单一(-20℃) 无需包被,直接培养
可支持不同来源间充质干细胞生长,包括:
• 脂肪来源间充质干细胞 ADSC
• 脐带来源间充质干细胞 UC-MSC
• 骨髓来源间充质干细胞BM-MSC
将Corning® MSC Xeno-Free SFM置于4℃冰箱至完全融化。
注意:不要将Corning® MSC Xeno-Free SFM反复冻融。为了不影响使用效果,4℃解冻后,建议在一个月内使用完。
将冻存复苏或原代分离的间充质干细胞利用Corning® MSC Xeno-Free SFM培养基直接接种于细胞培养瓶中(TCT 或者 CellBIND 表面处理均可)。
待细胞生长铺满(融合度约80-90%),移除培养基。PBS清洗,用0.25%胰蛋白酶消化3-5min。培养基终止,300g x 5 min离心获得细胞沉淀。新培养基重悬细胞沉淀,5000-10000/cm2接种于新的培养器皿中。培养基用量依据细胞培养器皿底面积,下表可供参考。
注意:细胞接种密度可依据实验计划、不同细胞类型及供体调整。
Vessel | Surface Area (cm2) | Medium volume (mL) |
T25 flask | 25 | 5 |
T75 flask | 75 | 15 |
T175 flask | 175 | 35-50 |
CellSTACK | 636 (1 chamber) | 150 |
HYPERflask | 1720 | 570 |
待细胞长满后,细胞可收获用于下游实验或冻存。
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货号 | 产品名称 | Qty/Pk | Qty/Cs |
21-040-CV | PBS缓冲液 | 6 | 1 |
25-051-CI | 0.05% Trypsin | 6 | 6 |
430639 | 组织培养表面处理T-25 flask | 20 | 200 |
3289 | CellBIND®表面处理 T-25 flask | 20 | 200 |
10024 | HYPERflask | 4 | 24 |
3313 | CellSTACK 5-chamber, TCT | 1 | 8 |
3311 | CellSTACK 5-chamber, CellBIND | 1 | 2 |
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产品是指能够提供给市场,被人们使用和消费,并能满足人们某种需求的任何东西,包括有形的物品、无形的服务、组织、观念或它们的组合。产品一般可以分为三个层次,即核心产品、形式产品、延伸产品。核心产品是指整体